4℃PBS中漂洗3次，用含15%小牛血清(NBS，华美公司)的DMEM培养液(美国Gibco公司)中和胰酶。分离表皮与真皮，将表皮层角朊细胞(基底细胞)刷下，并用10%的聚蔗糖(ficoll)(瑞典Pharmacia公司)进行密度梯度离心。计数细胞，用K-SFM培养基(美国Gibco公司)将细胞密度调整至1×106／ml，接种于35mm塑料培养皿(美国Corning公司)。12小时第1次换液，然后每2～3天换液。 1.3　角朊细胞胞浆乳酸脱氢酶(LDH)释放水平的测定

　　当上述培养细胞生长至70%融合时，加入茶多酚(不含NBS的DMEM配制)。根据LDH还原NAD的能力，于加样后12、24小时测定LDH［9］，以选择可能具有促进角朊细胞生长的合适的茶多酚剂量范围。 1.4　细胞生长情况测定

　　当细胞生长接近融合状态时，去除培养液，用PBS洗涤。加入含0.01mol/L EDTA的胰酶(0.25%)1ml，37℃温箱中10分钟左右，当部分细胞脱落时，倾去胰酶，加入含15%NBS的培养液1.5ml，轻轻吹打，并将细胞团块打散。然后加入1滴0.4%台盼蓝(美国Chroma公司)染液，在细胞计数板上计数着色与未着色细胞。分别求出不同