培养的角朊细胞加入茶多酚后24小时，用胰酶消化收集细胞。2×106个细胞用75%酒精固定，用0.1% triton 100漂洗离心7分钟，沉淀物用0.1% RNase处理(37℃ 30分钟)。用0.05%碘化丙啶染色DNA，用EPICS VI流式细胞仪测定DNA含量与分布［8］，确定有丝分裂不同细胞周期(G1、S、G2、M)细胞的百分含量及细胞凋亡发生率。并计算出增殖指数(PI，可综合反映细胞的增殖分裂能力)，PI=［(S+G2／M)／(G0／G1+S+G2／M)］×100%。 2　结　果 2.1　茶多酚对皮肤角朊细胞LDH释放的影响

　　分别在加入茶多酚后12和24小时，取细胞培养上清液0.5ml测定LDH。发现随着茶多酚浓度升高，LDH释放逐渐降低。茶多酚1 g/L时达到最低值；而浓度继续升高，LDH水平反而升高(表1)。表1　茶多酚对培养的皮肤角朊细胞乳酸脱氢酶释放水平的影响( 1  2  3  4  5  6  7  8  9  10  11  12