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1.1材料的处理
取枝梢下部2~3片成熟叶片为材料,钻取面积约为1.2cm2圆片,分别漂浮于1mg/L6-BA、5mg/L6-BA 溶液、6-BA+GA 混合液(各为2.5mg/L)和水中.每个处理取70~80个小圆片,各项处理分别光和暗两种条件下进行,室温25℃~27℃放置8天,每种处理重复3次。
1.2生理生化指标测定
1.2.1叶绿素含量测定 按Arnnan的方法取处理的圆叶片用95%乙醇研磨提取,滤液用721分光光度计测定光密度值,计算含量〔2〕。
1.2.2蛋白质含量测定 取处理的圆叶片加0.2mol/L磷酸缓冲液(pH6.0)研磨匀浆,离心取上清液加入考马斯亮兰溶液于721分光光度计595nm波长处测光密度值,计算含量〔3〕。
1.2.3SOD活性测定
将处理的圆叶片冲洗干净吸干后于4℃下加入0.05mol/L磷酸缓冲液(pH7.8)研磨匀浆,10000r/min离心20min,上清液用721分光光度计测定光密度值,计算酶活性,以抑制氮兰四唑光化还原50%为一个酶单位