6—BA对油茶离体叶片衰老的延缓作用
发布时间 2012-08-10 浏览 47162 次
期叶片衰老过程达到增产目的提供理论依据.1 材料与方法

1.1 材料的处理

取枝梢下部2~3片成熟叶片为材料,钻取面积约为1.2cm2圆片,分别漂浮于1mg/L6-BA、5mg/L6-BA 溶液、6-BA+GA 混合液(各为2.5mg/L)和水中.每个处理取70~80个小圆片,各项处理分别光和暗两种条件下进行,室温25℃~27℃放置8天,每种处理重复3次.

1.2 生理生化指标测定

1.2.1 叶绿素含量测定 按Arnnan的方法取处理的圆叶片用95%乙醇研磨提取,滤液用721分光光度计测定光密度值,计算含量〔2〕.

1.2.2 蛋白质含量测定 取处理的圆叶片加0.2mol/L磷酸缓冲液(pH6.0)研磨匀浆,离心取上清液加入考马斯亮兰溶液于721分光光度计595nm波长处测光密度值,计算含量〔3〕.

1.2.3 SOD活性测定 将处理的圆叶片冲洗干净吸干后于4℃下加入0.05mol/L磷酸缓冲液(pH7.8)研磨匀浆,10000r/min离心20min,上清液用721分光光度计测定光密度值,计算酶活性,以抑制氮兰四唑光化还原50%为一个酶单位〔4〕.

1.2.4 MDA含量测定 取处理的圆叶加蒸馏水研磨匀浆,在提取液中加入0.5%硫代巴比妥酸溶液沸水浴中煮沸10min,3000r/min 离心15min,取上清液测532nm和600nm处的光密度,计算过氧化脂质含量〔5〕.


1、2、3、4—光处理 1′、2′、3′、4′—暗处理

1,1′—对照2,2′—5mg/L6-BA 3,3′—1mg/L6-BA

4,4′—6-BA+GA(各2.5mg/L)

附图 不同浓度6-BA处理对油茶叶片各生理指标的影响

FIGURE Effect of 6-BA with different concentrations on the

physiological indexes of Camellia oleifera leaves2 试验结果

2.1 6-BA对油茶叶片叶绿素含量的影响

光照条件下5mg/L和1mg/L6-BA处理的油茶叶片的叶绿素含量分别为对照的115%和133%(经方差分析呈显著差异),暗条件下上述两种浓度的6-BA处理的叶片叶绿素含量分别为对照的106%和114%(附图).说明6-BA处理能维持较高的叶绿素含量,5mg/L6-BA处理的效果更佳,而且光照条件下有增益效应.

2.2 6-BA对油茶叶片蛋白质含量的影响

经过6-BA处理的油茶叶片蛋白质含量比对照的增加较多(附图).光照条件下以5mg/L和1mg/L6-BA处理的叶片蛋白质含量分别相当于对照的154%和120%.暗条件下上述两种浓度的6-BA处理的叶片蛋白质含量分别相当于对照的139%和118%.说明6-BA能有效地延缓叶片中蛋白质的降解从而延缓叶片衰老.也可以看出GA+6-BA混合液处理的叶片蛋白质含量与对照的无显著差异.

2.3 6-BA对油茶叶片SOD活性的影响

光照条件下以5mg/L和1mg/L6-BA处理的叶片SOD活性分别比对照的高29%和20%.暗条件下经上述两种浓度6-BA处理的叶片SOD活性分别比对照的高18%和13%.说明6-BA能维持叶片SOD活性较高水平,有效地防止叶片衰老.GA+6-BA混合液处理的叶片SOD活性与对照的也无明显差异(附图).

2.4 6-BA对油茶叶片MDA含量的影响

光照条件下经5mg/L和1mg/L6-BA处理的叶片MDA含量分别比对照的低27%和14%.暗条件下经上述两种浓度6-BA处理的叶片MDA含量分别比对照的低的22%和11%.说明6-BA能抑制油茶叶片的膜脂过氧化作用.GA+6-BA混合液处理的叶片MDA含量与对照的也无明显差异(附图).3 结论与讨论

茶叶片的光合色素、可溶性蛋白质含量、可以清除活性氧危害的SOD活性的降低和由于膜脂过氧化作用加强MDA含量增加而导致叶片衰老.以6-BA处理叶片可以明显影响这些生理过程.MDA的积累比对照少,SOD活性维持在较高水平,明显加强了细胞内清除自由基的能力,抑制膜脂的过氧化作用.Dhindsa等也发现激动素对燕麦叶片片段有防止MDA增加的作用〔6〕.可见细胞分裂素是通过影响蛋白质、类脂、色素等一系列代谢过程延缓叶片衰老的,以6-BA+GA混合液处理叶片对其生理过程无明显影响.

本试验结果,6-BA溶液的光照条件下处理叶片比暗条件下处理具有比较显著的效果.说明光对激素的作用有增益效应.表明以6-BA和GA等调节叶片衰老过程的效果可能因外界条件的差异而有所不同.

加入外源细胞分裂素可以延缓油茶叶片的衰老,延长光合器官的功能增加干物质,因此在林业生产实践上也具有参考价值.*福建省教委科学基金资助项目作者简介:胡哲森,男,1950年10月出生,副教授。作者单位:福建林学院资源与环境系 南平353001参考文献

1 林植芳等.水稻叶片的衰老;超氧物歧化酶及膜脂过氧化的变化.植物学报,1984,26(6):605~615

2 华东师范大学生物系植物生理教研室主编.植物生理学实验指导.北京:人民教育出版社,1980.68~166

3 李琳等.应用蛋白染色剂考马斯兰G—250测定蛋白质的方法.植物生理学通讯,1980,(6):52~55

4 黄学林等编.种子生理实验手册.北京:农业出版社,1990.127~130

5 朱广廉等编.植物生理学实验.北京:北京大学出版社1990.245~248

6 Dhindsa R S,Plumb-Dhindsa P L and D M Reis.Leaf senescence and lipid peroxidation:Effect of some phytohormones and scarengers of free redicals and singler oxygen.Plant Physiol,1982,56:453~457

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