表3结果表明,各保护组对NNK所致小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能早期的应激性增高(3天)和随后的降低(7天)均有明显保护效果,其中NNK+MT组在注射NNK后的3天恢复到NC组水平,NNK+GT和NNK+TP组也分别在注射NNK后的7天恢复到NC组水平。
茶及其成分对NNK所致小鼠外周血WBC-CL异常改变的保护效果见表4和表5。可以看出,在注射NNK后的早期(3天),1.0% GT对bCL的保护效果尚不明显,而0.5% MT和0.5% TP有一定保护效果;1.0% GT和0.5% MT对aCL的保护效果在NNK注射后早期(3天)均不明显,只有0.5% TP有一定保护效果,这可能与三种茶制剂的有效成分含量方面存在差异相关。但三种茶制剂在NNK注射后7天对小鼠WBC-CL的异常改变均有明显的保护效果,并完全恢复到NC组水平。
表6和表7结果表明,三种茶制剂在注射NNK后3天对NNK所致小鼠脾PFC和DTH的不良改变有明显的保护效果,结果均恢复到与NC组相当的水平。
综上所述,1.0%绿茶、0.5%复合茶和0.5%茶多酚对NNK所致小鼠免疫功能的异常改变,包括非特异免疫,体液免疫和细胞免疫,以及NK活性,均有明显的保护效果。 讨论
烟草及其烟雾中的有害成分对动物免疫系统的损伤是多方面的,并与吸烟致癌或诱发其他疾病相关联[13]。至今尚未见到有关烟草特异亚硝胺对动物免疫功能损伤的报道。本研究采用一次注射致癌剂量的NNK诱发小鼠免疫功能损伤的实验模型,观察到NNK引起多种免疫功能发生异常改变。其中,脾NK活性(细胞毒功能)和腹腔巨噬细胞吞噬功能(非特异免疫)出现双相性改变,即早期的应激性增高(注射NNK后3天)和随后的降低(注射NNK后7天),而脾抗细胞生成数(体液免疫)和迟发型变态反应(细胞免疫)均出现抑制性降低。相对而言,同样是反应非特异免疫功能的外周血白细胞化学发光的变化程度较重,且持续时间长,4周尚未完全恢复到正常对照组水平,其他免疫指标的变化程度相对较轻,分别在注射NNK后2周或4周完全恢复。提示NNK不仅对不同的免疫功能有不同的影响,而且所致免疫功能损伤的程度和时相也不同,其原因和机制有待进一步研究阐明。值得一提的是,虽然NNK为亲肺性致癌物,并在肝内进行代谢活化,但我们在观察的时间内并未发现肺、肝中NK活性的改变,这可能是由于NNK的致癌为远期效应,通常要在注射NNK后的数月才会出现癌变[14]。这些器官内NK活性的改变很可能出现在NNK注射后较晚的时期,并可能与肿瘤的发生直接相关,是否如此还有待进一步研究证实。
本研究以NNK诱发小鼠多种免疫功能改变的实验模型,观察绿茶、复合茶和茶多酚的免疫调节作用。结果表明,三种茶制剂对NNK所致小鼠免疫功能的异常改变均有较好的保护效果。值得指出的是:三种茶制剂对NNK所致小鼠免疫功能异常的调节作用因免疫指标而异,具有双向调节作用。对外周血白细胞化学发光、脾抗体生成细胞数及迟发性变态反应的异常改变的调节作用是随时间延长而逐渐恢复到正常对照水平的;而对NNK所致腹腔巨噬细胞吞噬功能和脾NK活性的异常增高或降低均能恢复到正常对照水平。作者单位:1 军事医学科学院放射医学研究所 北京市 100850,2 中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所参考文献 1 Preston-Martin S. Evaluation of the evidence that tobacco-specific N-nitrosamine (TSNA) cause cancer in humans. Crit Rev Toxicol, 1991,21:291-297. 2 Djordjevic MV, Brunnemann KD, Hoffmann D. Identification and analysis of a nicotine-derived N-nitosamino acid and other nitrosamino acids in tobcco. Carcinogenesis, 1989,10:1725-1733. 3 Hoffmann D, Rivenson A, Chung FL, et al. Nicotine-derived N-nitrosamines (TSNA) and their relevance in tobacco carcinogenesis. Crit Rev Toxicol, 1991,21:305-311. 4 Hecht SS, Hoffmann D. Tobacco-specific nitosamines, an important group of carcinogens in tobacco and tobacco smoke. Carcinogenesis, 1988,9:875-884. 5 Morse MA, LaGreca SD, Amin SC, et al. Effects of indole-3-carbinol on lung tumorigenesis and DNA methylation induced by 4-(methylnitrosamino-)-1-(3-pyridyl)-1-butanone (NNK) and on the metabolism and disposition of NNK in A/J mice. Cancer Res, 1990,50:2613-2617. 6 童小麟.儿茶素的理化性质.生物学作用及其开发应用研究进展.茶叶通讯,1989,4:37-41. 7 朱茂祥,龚诒芬,陈君石,等.绿茶对小鼠Lewis肺癌生长的抑制及免疫调节.中华预防医学杂志,1997,31:325-329. 8 谢克平,姚立人,史敏言,等.天然杀伤细胞活性的测定:2.体内YAC-1细胞清除试验.上海免疫学杂志,1988,8:291-295. 9 王小京.几种阿片肽及AMT对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的作用.中国免疫学杂志,1987,3:211-214.10 朱茂祥,龚诒芬,葛桂秀,等.大鼠吞噬细胞释放的自由基在放射性肺炎发展中的作用.中华放射医学与防护杂志,1996,16:96-99.11 Jene NK, Nordin AA. Plaque formation in agar by single antibody-producing cells. Science, 1963,140:405-410.12 薛彬,雷志明.T淋巴细胞功能检测.见:薛彬主编.免疫毒理学实验技术.北京:北京医科大学/中国协和医科大学联合出版社,1995.北京.27-28.13 Johnson JD, Houchens DP, Kluwe WW, et al. Effects of mainstream and environmental tobacco smoke on the immune system in animals and human. Crit Rev Toxicol, 1990,20:369-375.14 Hecht SS, Morse MA, Amin S, et al. Rapid single-dose model for lung tumor induced in A/J mice by 4-(methylnitrosamino-)-1-(3-pyridyl)-1-butanone and the effect of diet. Carcinogenesis, 1989,10:1901-1904.