酸羟胺溶液：10％。 4.2.5氨水溶液(1+1)。 4.2.6盐酸溶液(1+1)。 4.2.7盐酸溶液：O.1mol／L。 4.2.8环己烷：经测定无荧光杂质，有必要时重蒸馏后使用。 4.2.9甲酚红指示剂：称取O.1g甲酚红，加1滴50％氢氧化钠和10mL水溶解，并稀释到50mL。 4.2.102，3一二氨基萘(DAN)溶液：在暗室中配制。称取O.1gDAN，加0.1mol／L盐酸溶液100mL，振摇使其溶解。将溶液转入250mL分液漏斗中，加20mL环己烷，剧烈振摇5min，静置分层后，弃去环己烷相。再加入20mL环己烷，重复萃取三次，收集水相于100mL棕色容量瓶，用水定容并覆盖一层环己烷，储存于冰箱中，每次临用前再用20mL环己烷萃取一次。 4.2.11硒标准溶液：准确称取O.100Og硒(纯度≥99.9％)，加5mL硝酸，温热使其溶解；加水稀释到100mL，此溶液每毫升相当于100pg硒。 4.2.12硒标准工作液：吸取10.OmL硒标准溶液置于100mL容量瓶，以0.1mol／L盐酸溶液稀释至刻度，混匀，依次稀释到每毫升相当于O.1pg硒。 4.3仪器和设备 4.3.1荧光分光光度计。 4.3.2凯氏烧瓶：250mL。 4.3.3分液漏斗：125mL，250mL。 4.3.4电热恒温水浴锅。 4.3.5控温电炉。 4.3.6具塞三角烧瓶：100mL。 4.3.7具塞刻度试管：5mL。 4.4分析步骤 4.4.1样品前处理称取1.OOg样品置于250mL凯氏烧瓶中，用少量水润湿样品，加入18mL混合酸，在控温电炉上加热消化。应逐渐升高温度，消化至冒高氯酸白烟，保持1min，此时溶液呈无色或浅黄色，即为消化终点(在消化过程中如出现炭化现象，需重新取样消化)。取下冷却，加20mL水，继续加热至冒高氯酸白烟；取下稍冷，加lOmL水，待冷却到室温，用20mL～30mL水将样液转入100mL具塞三角烧瓶中，加O.19／6EDTA一2Na溶液2mL。 按样品操作步骤，同时做试剂空白及相应含量的硒标准。 4.4.24，5一苯并苤硒脑络合物的形成 在上述消化液中加入2滴甲酚红指示剂，以氨水溶液(1+1)和盐酸溶液(1+1)调节至溶液呈微橙红色。然后，加10％盐酸羟胺溶液1mL，放置2min，以下步骤需在暗室内进行。各加入DAN溶液2mL，摇匀，置沸水浴中加热5min，取出，冷却到室温。全部溶液转入125mL分液漏斗中，加入5mL环己烷，振摇萃取2min，静置分层，放出