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二、动物分组
实验动物随机分为正常对照(NC)、NNK对照(NNK-C)、1.0% GT+NNK(NNK+GT)、0.5% MT+NNK(NNK+MT)和0.5% TP+NNK(NNK+TP)5组,每组按不同处死时间又分为若干小组,每小组6只动物左右。
三、NNK配制及注射
按500 μmol/kg剂量称取NNK,加入1~2滴二甲基亚砜(终浓度<2‰)将NNK完全溶解,用生理盐水稀释后,过滤除菌,单次腹腔注射小鼠(每只0.5 ml)。
四、茶水、复合茶和茶多酚的配制
绿茶用沸水浸泡两次(每次20~30 min),合并两次浸出液配成浓度1.0%的茶水;复合茶和茶多酚用凉开水配成0.5%的溶液;从注射NNK前7天起供小鼠自由饮用;每日更换新鲜茶水、复合茶或茶多酚水溶液,并记录动物饮水量,直至处死。NC和NNK组饮凉开水。
五、观察指标
1.用体内YAC-1细胞清除试验测量小鼠NK活性[8]:将处于指数生长期的YAC-1细胞用51Cr标记