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1.2仪器设备
高效液相色谱仪(岛津LC-20AT),光化学衍生器(北京华安麦科生物技术有限公司)。
1.3 仪器条件
色谱柱:C18,5μm,4.6×250mm;流动相:甲醇: 水(55:45);流速:0.8mL/min;柱温:40℃;进样量:20µL;荧光检测器:激发波长:360nm,发射波长:440nm;柱后光化学衍生法:光化学衍生器。
1.4 方法对比
1.4.1 提取
称取粉碎后的样品 5.0 g 于 50 mL具塞离心管中,分别加入25 mL 乙腈-水 ( 80∶20, V /V),25mL 甲醇-水(70:30,V/V)和25mL 纯甲醇,2500rpm/min,涡旋震荡10min,4000rpm/min离心5min后,上清液备用。取10.0 mL滤液加入40.0 mL 0.1%吐温稀释,用玻璃纤维滤纸过滤 1 次~ 2 次,至滤液澄清,备用。
1.4.2 净化
将免疫亲和柱连接于10.0 mL