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茉莉花茶、绿茶的免疫调节和抑菌效应的实验研
发布时间 2011-07-28 浏览 39403 次
出液制备：横县绿茶与茉莉花茶，由横县茶协会提供。绿茶与茉莉花茶浸出液制备：将10克茶加入100 ml 90℃双蒸水中浸泡30分钟，加入0.8克氯化钠配成等渗原液，0.22 um微孔除菌过滤，收集滤液备用。
1.2实验动物：25只，SD大鼠200~250克，雄性，BALB/C小鼠25~30克，10只。
1.3实验分组与检测指标
1.3.1 实验分组：（1）对照组：在反应体系中加入1/5体积生理盐水。（2）绿茶GPA组与茉莉花茶FPA组：在反应体系中对应加入1/5体积的绿茶与茉莉花茶原液。（3）绿茶GPB组与茉莉花茶FPB组：在反应体系中对应加入1/10体积的绿茶与茉莉花茶原液。（4）绿茶GPC组与茉莉花茶FPC组：在反应体系中对应加入1/20体积的绿茶与茉莉花茶原液。
1.3.2 免疫调节实验：
1.3.2.1 中性粒细胞吞噬实验：取SD大鼠腹主动脉抽取抗凝血，采用明胶生理盐水沉淀法分离血中性白细胞，调细胞浓度为1.0×106/ml，取0.2ml用血浆配置细胞悬液，加入5ul 灭活金葡菌悬液（1×1010/ml），然后根据分组按比例加入绿茶与茉莉花茶原液，37℃孵浴30分钟，取细胞悬液制片，Wright`s 染色， 油镜下观察200个中性粒细胞吞噬细菌的情况，计算吞噬率，进行10个样本检测。
1.3.2.2 小鼠脾淋巴细胞转化实验：取BALB/C小鼠脾，撕碎，采用淋巴细胞分离液分离和纯化脾淋巴细胞，调细胞浓度为1.0×106/ml，在96孔板中每孔加入100 ul细胞悬液，并按3.1的实验分组按比例加入绿茶与茉莉花茶原液，在含PHA培养液中培养72小时，取细胞悬液制片，吉姆萨-瑞氏染色， 油镜下观察200个细胞中转化的淋巴细胞，计算淋巴细胞转化率。每个实验组为6个复孔。
1.3.3 抑菌实验：实验抑菌纸试片的制备：取直径6.0mm的无菌滤纸片，浸入两种茶液原液中，凉干备用。细菌选择：铜绿假单胞 、摩根氏菌、粘质沙雷氏菌 、 肺炎克雷伯菌 、金葡（MRSA）、金葡（25923）、溶血性葡萄球菌 。在接种好细菌后，采用贴滤纸片法观察抑菌圈，并测定抑菌圈直径大小。
1.3.4 统计学处理：数据采用t或t` 检验进行处理。
2 、结果
2.1 茉莉花茶、绿茶浸出液的免疫调节情况：具体见表1。茉莉花茶、绿茶浸出液对中性粒细胞的吞噬率无明显的提高，而且两者在各浓度组之间的差异也无显著意义。在较高浓度的GPA、GPB、FPA、FPB组中，脾淋巴细胞转化率均维持在52.6%~63.2%之间，除FPB外，均明显高于对照组的40.1%脾淋巴细胞转化率，但以上四组间无显著差异。此外脾淋巴细胞转化率在FPB组有升高趋势。
2.2 茉莉花茶、绿茶浸出液对中性粒细胞吞噬率与脾淋巴细胞转化率的影响
1.2实验动物：25只，SD大鼠200~250克，雄性，BALB/C小鼠25~30克，10只。
1.3实验分组与检测指标
1.3.1 实验分组：（1）对照组：在反应体系中加入1/5体积生理盐水。（2）绿茶GPA组与茉莉花茶FPA组：在反应体系中对应加入1/5体积的绿茶与茉莉花茶原液。（3）绿茶GPB组与茉莉花茶FPB组：在反应体系中对应加入1/10体积的绿茶与茉莉花茶原液。（4）绿茶GPC组与茉莉花茶FPC组：在反应体系中对应加入1/20体积的绿茶与茉莉花茶原液。
1.3.2 免疫调节实验：
1.3.2.1 中性粒细胞吞噬实验：取SD大鼠腹主动脉抽取抗凝血，采用明胶生理盐水沉淀法分离血中性白细胞，调细胞浓度为1.0×106/ml，取0.2ml用血浆配置细胞悬液，加入5ul 灭活金葡菌悬液（1×1010/ml），然后根据分组按比例加入绿茶与茉莉花茶原液，37℃孵浴30分钟，取细胞悬液制片，Wright`s 染色， 油镜下观察200个中性粒细胞吞噬细菌的情况，计算吞噬率，进行10个样本检测。
1.3.2.2 小鼠脾淋巴细胞转化实验：取BALB/C小鼠脾，撕碎，采用淋巴细胞分离液分离和纯化脾淋巴细胞，调细胞浓度为1.0×106/ml，在96孔板中每孔加入100 ul细胞悬液，并按3.1的实验分组按比例加入绿茶与茉莉花茶原液，在含PHA培养液中培养72小时，取细胞悬液制片，吉姆萨-瑞氏染色， 油镜下观察200个细胞中转化的淋巴细胞，计算淋巴细胞转化率。每个实验组为6个复孔。
1.3.3 抑菌实验：实验抑菌纸试片的制备：取直径6.0mm的无菌滤纸片，浸入两种茶液原液中，凉干备用。细菌选择：铜绿假单胞 、摩根氏菌、粘质沙雷氏菌 、 肺炎克雷伯菌 、金葡（MRSA）、金葡（25923）、溶血性葡萄球菌 。在接种好细菌后，采用贴滤纸片法观察抑菌圈，并测定抑菌圈直径大小。
1.3.4 统计学处理：数据采用t或t` 检验进行处理。
2 、结果
2.1 茉莉花茶、绿茶浸出液的免疫调节情况：具体见表1。茉莉花茶、绿茶浸出液对中性粒细胞的吞噬率无明显的提高，而且两者在各浓度组之间的差异也无显著意义。在较高浓度的GPA、GPB、FPA、FPB组中，脾淋巴细胞转化率均维持在52.6%~63.2%之间，除FPB外，均明显高于对照组的40.1%脾淋巴细胞转化率，但以上四组间无显著差异。此外脾淋巴细胞转化率在FPB组有升高趋势。
2.2 茉莉花茶、绿茶浸出液对中性粒细胞吞噬率与脾淋巴细胞转化率的影响
| 组别 中性粒细胞吞噬率（%） 脾淋巴细胞转化率（%） （n=10） （n=6） |
| GPA 78.6+8.2 63.2+8.5*GPB 72.4+12.3 59.4+7.9*GPC 76.3+6.3 &nbs
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