苦丁茶主要为冬青科植物枸骨(IlexCornutaLindl)和大叶冬青(IlexlatifilonThunb)的叶〔1〕。分布华东及广西等地。具散风热、清头目、治头痛等功用，常为日常饮茶之用。其所含主要化学成分为鞣质、皂甙、黄酮类〔2〕等成分。本文以芦丁为对照品，用分光光度法测定其含量，效果满意，方法简便可靠。 1　原理

　　黄酮类化合物与金属离子能形成稳定的呈色螯合物；于510nm处有最大吸收，可用分光光度法进行测定〔3〕。 2　仪器及试剂

　　采用721A型分光光度计(上海第三分析仪器厂)；芦丁对照品(中国药品生物制品检定所提供)；5%的亚硝酸钠及5%硝酸铝试液；4%氢氧化钠试液；其余实验所用试剂均为分析纯。 3　总黄酮的含量测定 3.1　测定波长的选择

　　取样品液适量，在0.3ml5%亚硝酸钠存在的碱性条件下，经硝酸铝显色后，以试剂为空白参比，于420～700nm范围内测定螯合物的吸收度；吸收曲线图略。螯合物于510nm处有最大的吸收。故测定时选用此波长。3.2

　　标准曲线的绘制

　　分别精密吸取芦丁对照液(0.1mg/ml)0.00,0.50,1.00,2.00,3.00,4.00,5.00ml于10ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至5.00ml，分别加入5%亚硝酸钠试液0.3ml，摇匀，静置6min，再加5%硝酸铝试液0.3ml，摇匀，静置6min，再加4%氢氧化钠试液4.00ml，用60%乙醇释释至刻度，摇匀，静置12min，以试剂作空白，于510nm处测吸收度，得回归方程：Y=0.8734X-0.0151，r=0.9999。3.3　样品总黄酮的含量测定

　　精密称取苦丁茶粉末(40目)约3g，加40ml95%乙醇，先泡0.5h，回流提取2h，抽滤，再加40ml95%乙醇回流提取1.5h，抽滤，合并滤液，减压回收乙醇至仅剩5～7ml为止，放100ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，得样品液。精密吸取样品液1.00ml，置10ml容量瓶中，余下按3.2项下操作，测得吸收度，结果如表1。表1　样品总黄酮的含量测定结果编号样品量(g) 吸收度样品总黄酮(%) 均值(%) RSD(%) 1—1 2.9273 0.599 2.40 　　 1—2 2.9897 0.612 2.41 2.40 0.42 1—3 3.1305 0.635 2.38 　　 2—1 3.0464 0.653 2.51 　　 2—2 3.0350 0.645 2.49 2.50 0.40 2—3 3.0425 0.648 2.49 　　 3.4　样品加样回收试验

　　为验证提取方法的可靠性，采用了将同一批的苦丁茶叶粉末(40目)称取8份，每2份作一组，一份加入已知量的芦丁对照品，在与测定方法相同条件下，进行提取和测量，结果如表2。 表2　样品加样回收试验结果组别样品含量(mg) 加入量(mg) 测得量(mg) 回收率(%) 1 71.56 5.80 77.41 100.06 2 72.05 4.00 76.15 100.13 3 74.53 3.60 78.09 99.95 4 74.32 4.70 79.01 99.99 平均回收率(%)=100.04RSD=0.06(%) 4　讨论4.1　为使黄酮提取完全，回流提取后的过滤宜用抽滤，把药渣抽干。但过滤杂质沉淀时，不宜用抽滤。4.2　经实验证明，乙醇提取液浓缩后加等量水能有效地使杂质沉淀排除干扰。4.3　样品含量测定结果中，第一批样品的总黄酮含量低于第二批样品，说明苦丁茶叶中总黄酮含量与采收地点、时间等因素有关。 5　小结

　　苦丁茶叶含黄酮类成分，黄酮类具有多种生理活性。本文研究内容对进一步利用苦丁茶提供了科学依据。作者单位：张毅贞(广西中医学院药学系　南宁　530001)

　　　李鉴明(广西药科学校　南宁　530023)

　　　李　宁(广东深圳松岗人民医院　深圳宝安　518105) 参考文献　1　江苏新医学院.中药大辞典.上海科学技术出版社，1997.1288　2　陈杖洲.珍稀植物代用茶——苦丁茶.茶叶.1995，21(1)：39～40　3　庄向平.杨更生等.银杏叶黄酮含量的测定和提取方法.中草药.1992，23(3)：122 (编辑　梁天坚) 收稿日期：1999-01-13