4、操作方法
4.1 取样
按GB 8302—87《茶 取样》规定取样。
4.2 试样的制备
按GB 8303—87《茶 磨碎试样的制备及其干物质含量测定》的规定,制备试样。
4.3 测定步骤
4.3.1 试液的制备
按GB 8305—87《茶 水浸出物测定》中3.4.1的规定,制备试液。
4.3.2 测定
准确吸取试液(4.3.1)1mL,注入25mL容量瓶中,加0.5mLpH8.0缓冲液(3.1)和0.5mL2%茚三酮溶液(3.2),在沸水浴中加热15min。待冷却后加水定容至25mL。放置10min后,用5mm比色杯,在570nm处,以试剂空白溶液作参比,测定吸光度(A)。
4.3.3 氨基酸定量标准曲线的制作
分别吸取0.0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL氨基酸工作液(3.3)于一组25mL容量瓶中,各加水4mL、茚三酮溶液(3.2) 0.5mL和缓冲液(3.1) 2mL,在沸水浴中加热15min,冷却后加水定容至25mL,按4.3.2的操作测定吸光度(A)。将测得的吸光度与对应的茶氨酸或谷氨酸浓度绘制标准曲线。
注: 制作标准曲线时,所用蒸馏水,必须是二次蒸馏水。
5、结果计算
5.1 计算方法和公式
茶叶中游离氨基酸含量,以干态质量百分率表示,按下式计算:
C L1
──×──
1000 L2
游离氨基酸总量(%)= ───── ×100
M×m
式中: L1——试液总量,mL;
L2——测定用试样量,mL;
M——试样量,g;
C——根据4.3.2测定的吸光度从标准曲线上查得的茶氨酸的mg数;
m——试样干物质含量百分率,%。
如果符合重复性(5.2)的要求,取两次测定的算术平均值作为结果。
5.2 重复性
同一样品进行两次测定,测定值之差,每100g试样不得超过0.1g。
6、结果报告
试验报告应包括下列内容:
a. 使用的方法;
b. 测定的结果(取小数点后一位);
c. 本标准中末规定的或另加的操作;
d. 试样的名称和产地;
e. 试验日期,操作人员。