图略

2.2 温度对ppo活性的影响

以邻 苯 二 酚为底物，pHS.6条件下测定不同温度对多酚氧化酶活性的影响，结果如图2.茶多酚氧化酶对温度很敏感，其最适温度为50 ℃.温度比最适温度低时，随着温度的升高，酶活性也升高，直至最适温度才表现最大活力，但是温度高于最适温度以上时酶活性呈直线下降，温度升至80℃时，茶多酚氧化酶的活性完全受到抑制.所以，调节反应温度可以有效提高多酚氧化酶活性.

图略

2.3 亚硫酸钠、半肤氨酸和V一C对pPO活性的影响底物 为 ro lnln o比邻苯二酚，在37℃，pHS.6时测定不同添加剂对多酚氧化酶的抑制作用，结果见图3，亚硫酸钠、半胧氨酸和v一C都对茶叶中的多酚氧化酶有强烈的抑制作用.当V一C浓度达到0.Znuno 比，N屯503浓度达到。，3nlnoUL，半胧氨酸浓度达到0.4Inln o比，均能完全抑制茶多酚氧化酶的活性.

图略

.4 不同底物对PO活性的影响

以不 同 底 物测定酶促反应的动力学性质.根据中间复合物假说，在pHS.6，37℃条件下，测定了不同底物存在时的吸光值，采用Lineweaver-Burk双倒数法求得各底物的为n和Vhlax，结果见表1.

图略

从以 上 结 果中可以看出，不同底物对茶多酚氧化酶的催化反应有不同的尤由和竹nax .4个底物中，茶多酚氧化酶的最佳底物是Ecg，其次是EGCg，焦性没食子酸和儿茶酚.但从反应速度来讲，儿茶酚的Vmax最大，其余大小依次是儿茶酚，Ecg，Eocg，焦性没食子酸.

3 讨论

PPO 是 一 种含铜的蛋白质，其作用机制在于铜的氧化还原作用，在酸性环境中，酶中cu2+被解离出来，使酶失活，而在碱性环境中酶蛋白与cu2+脱离成为不溶性氢氧化铜，也能使酶失活fl‘].本试验以邻苯二酚为底物，茶鲜叶中多酚氧化酶的最适pH约为5.6.不处于最适pH条件下时，PPO都不能充分发挥其催化作用.因此，控制适宜的pH值能有效提高酶活性，有利于酶促反应的进行.同时，儿茶素的组成和温度等条件也对酶促反应影响较大，

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