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茶多酚氧化酶酶学性质研究
发布时间 2011-07-17 浏览 13544 次
病毒、抗氧化、降脂等多种药理功能，并对动脉粥样硬化、高血压、龋齿等都有一定的防治效果叫].研究茶多酚氧化酶的生物学特性，是茶叶生化领域的一大热点.掌握多酚氧化酶的特性，可以为红茶加工过程中控制适度发酵及提高茶黄素的含量提供理论依据，丰富茶叶加工及生物化学理论.
1 材料与方法
1.1 材料
茶鲜 叶 储 叶齐，采于长沙高桥茶园，储藏于一70℃冰柜中.
1.2 方法
1.2.I PPO的提取
取 50 9， 一70 ℃茶鲜叶加人到30mL预冷的柠檬酸一磷酸氢二钠缓冲液(PHS.6)中，并加人109Pvpp和0.59琴c，在组织粉碎机中匀浆2次，每次2而n.匀浆物收集于大三角瓶中，于4℃冰箱中，静置浸提12h，其间振荡2次.将浸提后的酶液经4层纱布过滤后，在冷冻离心机中以4℃离心2次，每次20而n，转速分别为40(刃和9。叹川min，弃去沉淀，边搅拌边向上清液中加人固体硫酸按分级盐析，取30%一80%盐析沉淀物经pHS.6的柠檬酸一磷酸氢二钠缓冲液透析，即得到茶多酚氧化酶粗酶液.
1.2.Z PO活性测定及最佳反应条件的确定于3 7 ，
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