品检定所提供);5%的亚硝酸钠及5%硝酸铝试液;4%氢氧化钠试液;其余实验所用试剂均为分析纯。
3 总黄酮的含量测定3.1 测定波长的选择
取样品液适量,在0.3ml5%亚硝酸钠存在的碱性条件下,经硝酸铝显色后,以试剂为空白参比,于420~700nm范围内测定螯合物的吸收度;吸收曲线图略。螯合物于510nm处有最大的吸收。故测定时选用此波长。
3.2 标准曲线的绘制
分别精密吸取芦丁对照液(0.1mg/ml)0.00,0.50,1.00,2.00,3.00,4.00,5.00ml于10ml容量瓶中,用60%乙醇稀释至5.00ml,分别加入5%亚硝酸钠试液0.3ml,摇匀,静置6min,再加5%硝酸铝试液0.3ml,摇匀,静置6min,再加4%氢氧化钠试液4.00ml,用60%乙醇释释至刻度,摇匀,静置12min,以试剂作空白,于510nm处测吸收度,得回归方程:Y=0.8734X-0.0151,r=0.9999。
3.3 样品总黄酮的含量测定
精密称取苦丁茶粉末(40目)约3g,加40ml95%乙醇,先泡0.5h,回流提取2h,抽滤