6 试剂和溶液

所用试剂应为分析纯(AR)，水为蒸馏水。

6.1 pH8.0磷酸盐缓冲液：按GB/T 8313—2002中6.2的规定，配制1/15mol/L磷酸氢二钠(6.2.1)和1/15mol/L磷酸二氢钾(6.2.2)溶液。然后取1/15mol/L的磷酸氢二钠溶液95mL和1/15mol/L磷酸二氢钾溶液5mL，混匀。

6.2 2%茚三酮溶液：称取水合茚三酮(纯度不低于99%)2g，加50mL水和80mg氯化亚锡(SnCl22H2O)搅拌均匀。分次加少量水溶解，放在暗处，静置一昼夜，过滤后加水定容至100mL。

6.3 茶氨酸或谷氨酸标准液：称取100mg茶氨酸或谷氨酸(纯度不低于99%)溶于100mL水中，作为母液。准确吸取5mL母液，加水定容至50mL作为工作液(1mL含茶氨酸或谷氨酸0.1mg)。

7 操作方法

7.1 取样

按GB/T 8302的规定。

7.2 试样制备

按照GB/T 8303的规定。

7.3 测定步骤

7.3.1 试液的制备

按GB/T 8312—2002中11.1的规定。

7.3.2 测定

准确吸取试液(7.3.1)1mL，注入25mL的容量瓶中，加0.5mL pH8.0磷酸盐缓冲液(6.1)和0.5mL 2%茚三酮溶液(6.2)，在沸水浴中加热15min。待冷却后加水定容至25mL。放置10min后，用5mm比色杯，在570nm处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度(A)。

7.3.3 氨基酸标准曲线的制作

分别吸取0.0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL氨基酸工作液(6.3)于一组25mL容量瓶中，各加水4mL、pH 8.0磷酸盐缓冲液(6.1)0.5mL和2%茚三酮溶液(6.2)0.5mL，在沸水浴中加热15min，冷却后加水定容至25mL，按7.3.2的操作测定吸光度(A)。将测得的吸光度与对应的茶氨酸或谷氨酸浓度绘制标准曲线。

8 结果计算

8.1 计算方法

茶叶中游离氨基酸含量以干态质量分数表示，按式(1)计算：

8.2 重复性

同一样品的两次测定值之差，每100g试样不得超过0.1g。