3.4.1的规定，制备试液。4.3.2 测定用移液管准确吸取试液(4.3.1)20mL移入250mL容量瓶中，加入10mL0.01N盐酸(3.2)和2mL碱性乙酸铅溶液(3.1)，用水准确稀释至刻度，充分混匀，静置澄清过滤，准确吸取滤液50mL，注入100mL容量瓶中，加入0.2m19N硫酸溶液(3.3)，加水稀释至刻度，混匀，静置澄清过滤。用10mm比色杯，在波长274nm处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度(A)。4.3.3 咖啡碱标准曲线的制作分别吸取0、5、10、15、20、25、30mL咖啡碱工作液(3.4)于一组100mL容量瓶中，各加入4.0mL盐酸溶液(3.2)，用水稀释至刻度，混匀，用10mm石英比色杯，在紫外分光光度仪上选择狭缝0.1～0.18mm，在波长274nm处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度(A)。将测得的吸光度与对应的咖啡碱浓度绘制标准曲线。5、结果计算5.1 计算方法和公式茶叶中咖啡碱含量，以干态质量百分率表示，按下式计算:C 250 100──×L1×──×──1000 20 50咖啡碱(％)＝───────────×100M×m式中:C——根据试样测得的吸光度(A)，从咖啡碱标准曲线上查得的咖啡碱相应含量，mg