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.4 不同底物对PO活性的影响
以不 同 底 物测定酶促反应的动力学性质.根据中间复合物假说,在pHS.6,37℃条件下,测定了不同底物存在时的吸光值,采用Lineweaver-Burk双倒数法求得各底物的为n和Vhlax,结果见表1.
图略
从以 上 结 果中可以看出,不同底物对茶多酚氧化酶的催化反应有不同的尤由和竹nax .4个底物中,茶多酚氧化酶的最佳底物是Ecg,其次是EGCg,焦性没食子酸和儿茶酚.但从反应速度来讲,儿茶酚的Vmax最大,其余大小依次是儿茶酚,Ecg,Eocg,焦性没食子酸.
3 讨论
PPO 是 一 种含铜的蛋白质,其作用机制在于铜的氧化还原作用,在酸性环境中,酶中cu2+被解离出来,使酶失活,而在碱性环境中酶蛋白与cu2+脱离成为不溶性氢氧化铜,也能使酶失活fl‘].本试验以邻苯二酚为底物,茶鲜叶中多酚氧化酶的最适pH约为5.6.不处于最适pH条件下时,PPO都不能充分发挥其催化作用.因此,控制适宜的pH值能有效提高酶活性,有利